初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo):鼠疫耶爾森菌簡(jiǎn)介
初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo):鼠疫耶爾森菌簡(jiǎn)介
鼠疫耶爾森菌俗稱(chēng)鼠疫桿菌,是烈性傳染病鼠疫的病原菌。鼠疫是自然疫源性傳染病,通過(guò)直接接觸染疫動(dòng)物或節(jié)肢動(dòng)物叮咬而感染。臨床常見(jiàn)腺鼠疫、敗血型鼠疫和肺鼠疫。
1.生物學(xué)特征
(1)形態(tài)與染色:鼠疫耶爾森菌為革蘭陰性桿菌,形態(tài)短而粗,兩端鈍圓,兩極濃染,大小為(1.0~2.0)μm×(0.5~0.7)μm.有莢膜,無(wú)鞭毛,無(wú)芽孢。陳舊培養(yǎng)物或3%氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基上呈明顯多形性。
(2)培養(yǎng):需氧和兼性厭氧,在普通培養(yǎng)基上即可生長(zhǎng)。最適生長(zhǎng)溫度是28℃~30℃。培養(yǎng)基最適pH為6.9~7.1.培養(yǎng)16~18h,用顯微鏡觀察可見(jiàn)一層形狀不一,淺灰色小菌落,這是鼠疫耶爾森菌培養(yǎng)初期的菌落特征,這對(duì)本菌的鑒定有一定意義。在培養(yǎng)24~48h后可形成直徑0.1~0.2mm,圓形。中心突出,透明的淺灰色小菌落。72h后菌落直徑可達(dá)4mm.在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,開(kāi)始渾濁生長(zhǎng),24h后為沉淀生長(zhǎng),48h后形成菌膜,稍加震動(dòng)菌膜呈鐘乳石狀下垂。
(3)生化反應(yīng):不活躍,在雙糖鐵培養(yǎng)基上可分解葡萄糖,少數(shù)菌株可分解乳糖,不產(chǎn)生硫化氫,MIU培養(yǎng)基無(wú)動(dòng)力,不產(chǎn)生靛基質(zhì),尿素酶試驗(yàn)陰性。
2.微生物學(xué)檢驗(yàn)
(1)標(biāo)本采集:主要采集血液、痰和淋巴結(jié)穿刺液。
(2)檢驗(yàn)方法及鑒定:鼠疫耶爾森菌為甲類(lèi)病原菌,傳染性極強(qiáng),故應(yīng)嚴(yán)格遵守檢驗(yàn)操作規(guī)程,要求實(shí)驗(yàn)室有隔離設(shè)施,防鼠、防蚤和嚴(yán)密的個(gè)人防護(hù)措施;用過(guò)的實(shí)驗(yàn)器材及物品隨時(shí)消毒處理。
1)直接涂片檢查:一般制片兩張,分別用于革蘭染色和美藍(lán)染色,可見(jiàn)革蘭陰性球桿菌,形似芝麻,兩端濃染。
2)分離培養(yǎng):鼠疫耶爾森菌學(xué)檢驗(yàn)中分離培養(yǎng)步驟十分重要,分離培養(yǎng)時(shí)未污染標(biāo)本可直接接種血平板,污染標(biāo)本則需接種選擇性培養(yǎng)基,如龍膽紫亞硫酸鈉瓊脂。經(jīng)28℃~30℃培養(yǎng)24~48h后,挑選菌落作鑒定。
3)鑒定:根據(jù)菌落特征,細(xì)菌形態(tài)和肉湯中呈“鐘乳石”狀發(fā)育,KIA結(jié)果利用葡萄糖,不利用乳糖,不產(chǎn)H2S,MIU均為陰性反應(yīng)。為作最后鑒定應(yīng)補(bǔ)充以下實(shí)驗(yàn)方法:①噬菌體裂解試驗(yàn);②動(dòng)物試驗(yàn);③免疫學(xué)方法。
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