初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo)：埃希菌屬概述

　　初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo)：埃希菌屬概述

　　(一)埃希菌屬概念

　　埃希菌屬包括5個(gè)種，即大腸埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。臨床最常見的是大腸埃希菌。

　　大腸埃希菌俗稱大腸桿菌，大多數(shù)菌株是人類和動(dòng)物腸道正常菌群。

　　(二)生物學(xué)特性(性狀)

　　1.形態(tài)與染色：為革蘭陰性短桿菌，(1.0～3.0)μm×(0.4～0.7)μm.多數(shù)有周鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。有菌毛、莢膜及微莢膜。

　　2.培養(yǎng)特性：兼性厭氧菌，營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通營(yíng)養(yǎng)肉湯中呈渾濁生長(zhǎng)。普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂上呈灰白色的光滑型菌落。血瓊脂平板上，少數(shù)菌株產(chǎn)生溶血環(huán)。在伊紅美藍(lán)瓊脂上，由于發(fā)酵乳糖，菌落呈藍(lán)紫色并有金屬光澤。麥康凱和SS瓊脂中的膽鹽對(duì)其有抑制作用，耐受菌株能生長(zhǎng)并形成粉紅色菌落。

　　3.生化反應(yīng)：吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗(yàn)(IMViC試驗(yàn))為++--(腸桿菌屬多為--++)。克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)上斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣，H2S陰性。動(dòng)力、吲哚、尿素(MIU)培養(yǎng)基的生化反應(yīng)為++-.

　　4.抗原結(jié)構(gòu)：大腸埃希菌的抗原由菌體抗原(O)、表面抗原(K)和鞭毛抗原(H)三種構(gòu)成?，F(xiàn)已知有171種O抗原，100種K抗原和56種H抗原。一個(gè)菌株的抗原類型由特殊的0、K和H抗原的代碼表示，其血清型別的方式是按O:K:H排列，例如O111:K58(B4):H2.

　　(三)致病性

　　主要是侵襲力、內(nèi)毒素、腸毒素等致病因素引起各種炎癥(如膽囊炎、泌尿系感染、肺炎、新生兒腦膜炎、傷口感染、菌血癥及腹瀉等)。內(nèi)毒素還可引起發(fā)熱、休克、DIC等。

　　1.腸道外感染：主要由正常菌群條件致病，以泌尿系統(tǒng)感染常見，高位嚴(yán)重尿道感染與特殊血清型大腸埃希菌有關(guān)。如菌血癥、膽囊炎、腹腔內(nèi)膿腫。

　　2.腸道感染：致病性大腸埃希菌有下列五個(gè)病原群。

　　(1)腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌(ETEC)：引起霍亂樣腸毒素腹瀉(水樣瀉)。

　　(2)腸致病型大腸埃希菌(EPEC)：主要引起嬰兒腹瀉。

　　(3)腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC)：可侵入結(jié)腸黏膜上皮，引起志賀樣腹瀉(能產(chǎn)生粘液膿血便)。

　　(4)腸出血型大腸埃希菌(EHEC)：又稱產(chǎn)志賀樣毒素(VT)大腸埃希菌(SLTEC或UTEC)，其中O157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征(HUS)。臨床特征為嚴(yán)重的腹痛、痙攣，反復(fù)出血性腹瀉，伴發(fā)熱、嘔吐等。嚴(yán)重者可發(fā)展為急性腎衰竭。

　　(5)腸粘附(集聚)型大腸埃希菌(EAggEC)：也是新近報(bào)道的一種能引起腹瀉的大腸埃希菌。

　　3.CDC將大腸埃希氏菌O157：H7列為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目

　　EHEC的血清型>50種，最具代表性的是O157：H7.在北美許多地區(qū)，O157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見的病原菌，分離率占血便的40%，6、7、8三個(gè)月O157：H7感染的發(fā)生率最高。且0157是4歲以下兒童急性腎功衰的主要病原菌，所以CDC提出應(yīng)將大腸埃希氏菌0157：H7列為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。

　　(四)微生物學(xué)檢驗(yàn)

　　1.標(biāo)本采集：腸道感染可采集糞便;腸道外感染可根據(jù)臨床感染情況采集中段尿液、血液、膿汁、膽汁、腦脊液、痰、分泌液等。

　　2.檢驗(yàn)方法及鑒定

　　(1)涂片與鏡檢：膿汁及增菌培養(yǎng)物發(fā)現(xiàn)單一革蘭陰性桿菌，可初步報(bào)告染色、形態(tài)、性狀供臨床用藥參考。

　　(2)分離培養(yǎng)：糞便標(biāo)本可用弱選擇鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行分離，膿汁等可用血平板分離，取可疑菌落進(jìn)行形態(tài)觀察及生化反應(yīng)。

　　(3)鑒定

　　1)初步鑒定：根據(jù)菌落特征，涂片染色的菌形及染色反應(yīng)，取純培養(yǎng)物作生化反應(yīng)。凡符合KIA：A/A或K/A、產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣、H2S-;MIU：動(dòng)力+或-、吲哚+、脲酶-;氧化酶-，IMViC：++--，可鑒定為大腸埃希菌。

　　2)致病性大腸埃希菌：

　　EPEC的鑒定：

　　EIEC的鑒定：應(yīng)與志賀菌相鑒別，兩者的主要鑒別試驗(yàn)可用醋酸鈉和葡萄糖銨利用試驗(yàn)及粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸三種試驗(yàn)。大腸埃希菌均為陽(yáng)性，而志賀菌均為陰性。

　　ETEC毒素的檢測(cè)：采用改良Elek法測(cè)定LT并采用乳鼠胃內(nèi)灌注法檢測(cè)ST.

　　EHEC的血清學(xué)鑒定：

　　EAEC的鑒定：檢測(cè)細(xì)菌對(duì)HEP-2細(xì)胞或Hela細(xì)胞的粘附性。

　　腸道外感染，經(jīng)涂片染色，分離培養(yǎng)后，生化鑒定到種;由于大腸埃希菌是超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的主要產(chǎn)酶株，該酶由質(zhì)粒介導(dǎo)。對(duì)ESBLs產(chǎn)酶株所致感染需要采用碳青酶烯類或內(nèi)酰胺類抗生素/酶抑制劑或頭霉菌素類進(jìn)行治療。腸道內(nèi)感染還需做血清分型、毒素測(cè)定或毒力試驗(yàn)。食物、飲料、水等衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查，主要進(jìn)行大腸菌群指數(shù)檢測(cè)。

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