初級檢驗技師考試輔導(dǎo):白細(xì)胞計數(shù)
初級檢驗技師考試輔導(dǎo):白細(xì)胞計數(shù) $lesson$
白細(xì)胞計數(shù)
1.實驗原理:用稀乙酸將血液稀釋并破壞紅細(xì)胞,混勻后,滴入計數(shù)盤中,在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的白細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求得每升血液中白細(xì)胞總數(shù)。
2 方法學(xué)評價 顯微鏡記數(shù)法 血液分析儀記數(shù)法
3 質(zhì)量控制
1)經(jīng)驗控制
2)計數(shù)誤差 技術(shù)誤差 固有誤差 有核紅細(xì)胞影響
3)質(zhì)量控制
a.常規(guī)考核標(biāo)準(zhǔn)(RCS)評價:適用于室內(nèi)質(zhì)控
RCS= ×100%
白細(xì)胞≤4×109/L者,RCS<30%;白細(xì)胞在(4.1-14.9)×109/L者,RCS<20%;白細(xì)胞≥15×109/L者,RCS<15%;超過上述標(biāo)準(zhǔn)者為不合格
b.變異系數(shù)評價法:30人上技術(shù)考核。
c.兩差比值評價法:個人技術(shù)考核。
4 參考值
成 人:(4-10)×109/L
新 生 兒: (15-20)×109/L
6月- 2歲:(11-12)×109/L
5 臨床意義 與中性粒細(xì)胞的臨床意義一致
白細(xì)胞增;白細(xì)胞減低
6 操作方法 (熟練掌握)
1) 顯微鏡記數(shù)法
實驗試劑:
白細(xì)胞稀釋液:2%冰乙酸溶液中加入10g/L亞甲藍(lán)3滴。
實驗器材:同紅細(xì)胞計數(shù)
實驗操作
a.加白細(xì)胞稀釋液0.38ml于一小試管中;
b.用微量吸管吸取20ul末梢血。
c.擦去微量吸管外余血,將其插入稀釋液底部,輕輕將血放出,并吸取上
清液洗滌微量吸管3次,混勻。
d.用微量吸管或玻璃棒取混勻的細(xì)胞懸液1滴,充入計數(shù)池與蓋片的縫隙
中,靜置2-3min,使白細(xì)胞下沉。
e.低倍鏡計數(shù)四角4個大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。
結(jié)果計算
X/4×10×20×106/L=白細(xì)胞/L
公式中:在法定計量單位制中用N×109/L表示。
X:為4個大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。
÷4:為每大方格(即0.1ul)內(nèi)白細(xì)胞平均數(shù)。
×10:1個大方格的容積為0.1ul,換算成1ul。
×20:血液的稀釋倍數(shù)。
×106:將ul換算成L。
2)注意事項
⊙采血時不能擠壓過度,因此針刺深度必須適當(dāng)。
⊙在大方格內(nèi)壓線細(xì)胞應(yīng)按計數(shù)原則計數(shù)。
⊙稀釋液要過濾,實驗器材須清潔,以免雜質(zhì)微粒影響。
⊙充池前的搖勻要注意,氣泡不能太多。
⊙加蓋玻片方式:“推式”,不要“蓋式”。