初級檢驗技士考試復習資料：肺炎支原體
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初級檢驗技士考試復習資料：肺炎支原體$lesson$
肺炎支原體
(一)生物學特性
菌體呈短細絲狀，典型的形態(tài)類似酒瓶狀，沒有細胞壁，僅有細胞膜。Giemsa染色呈淡紫色。分離培養(yǎng)的最適pH為7.6-8.0。P1蛋白是肺炎支原體主要特異性免疫原，是目前血清學診斷的主要抗原。
(二)致病性
肺炎支原體可從口腔、呼吸道分離到，主要通過飛沫傳染，是人類原發(fā)性非典型性肺炎的主要病原體之一。兒童和青少年易感，首先引起上呼吸道感染，然后下行感染。病理性變化主要是間質(zhì)性肺炎、急性細支氣管炎。還可引起肺外并發(fā)癥。
(三)微生物學檢驗
采集咽分泌物、痰、支氣管分泌物、胸水等。
1、分離與鑒定
這是確診支原體感染的可靠方法之一。常以牛心消化液為基礎另加20%小牛血清及新鮮酵母浸液制成液體或固體培養(yǎng)基。初次分離生長緩慢，通常先將標本接種于液體培養(yǎng)基中增菌，1周后培養(yǎng)基指示劑顏色改變，液體清晰，可轉(zhuǎn)種于固體平板培養(yǎng)基，在5%CO2環(huán)境中培養(yǎng)，初次分離肺炎支原體需1-2周才長菌落。菌落常不出現(xiàn)“荷包蛋”樣，需經(jīng)數(shù)次傳代后，菌落開始典型。肺炎支原體分離培養(yǎng)有時需20天或更長時間，對臨床快速診斷意義不大。
支原體在固體培養(yǎng)基上長出典型菌落，依此可初步診斷，再進一步進行生化反應和血清學鑒定。生化反應如：
(1)葡萄糖、精氨酸、尿素分解試驗：發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，不能利用精氨酸、尿酸。
(2)氯化三苯基四氮唑(TTC)還原試驗：使無色TTC還原為粉紅色。
(3)生長抑制試驗(GIT)和代謝抑制試驗(MIT)。
(4)紅細胞吸附試驗：肺炎支原體的菌落能發(fā)生紅細胞吸附。
2、血清學試驗
(1)特異性血清學試驗
1)ELISA技術：敏感性和特異性高，快速、經(jīng)濟，并可檢測IgM和IgG抗體，為目前診斷的可靠方法。利用ELISA捕獲法，以抗P1蛋白單抗檢測標本中的肺炎支原體P1蛋白，特異性高，敏感性高。
2)補體結合(CF)試驗
診斷肺炎支原體常用的血清學方法，一般血清學滴度≥1：64~1：128即為陽性，病程中雙份血清至少效價有4倍增長，近期感染可能性越大。主要檢測IgM抗體。初次感染時出現(xiàn)陽性，再次感染時常不出現(xiàn)陽性。
3)間接血細胞凝集試驗
敏感度略高于補體結合試驗，主要檢測IgM抗體。
(2)非特異性血清學試驗
冷凝集試驗：將患者血清與O型Rh陰性紅細胞在4℃下作凝集試驗。一般血清學滴度≥1：64為陽性，病程中雙份血清至少效價有4倍增長，近期感染可能性越大。
3、PCR試驗快速檢測：敏感和特異性高，以特異性引物通過該技術從患者痰中檢測肺炎支原體DNA。