2013檢驗(yàn)主管技師考試臨床化學(xué):血清蛋白質(zhì)的電泳分析
點(diǎn)擊進(jìn)入:2013年檢驗(yàn)技師考試時(shí)間:5月18、19、25、26
醋酸纖維薄膜(ACM)和瓊脂糖凝膠是目前最廣泛采用的兩類介質(zhì)。巴比妥緩沖液pH8.6,離子強(qiáng)度0.05,標(biāo)本用量3-5μl,標(biāo)準(zhǔn)電泳條件為CAM每厘米寬電流0.75mA,瓊脂糖約為每厘米寬10mA,電泳時(shí)間40-60分鐘,電泳前沿達(dá)6cm左右。雖然目前已開展和應(yīng)用不少個(gè)別蛋白質(zhì)的測定方法,但血漿蛋白質(zhì)電泳圖譜至今仍然是了解血漿蛋白質(zhì)全貌的有價(jià)值的方法,可用為初篩試驗(yàn),以提供較全面的信息。正常血清電泳后可以很好地分為5條區(qū)帶(Alb、α1、α2、β1、β2),新鮮標(biāo)本可以分出β帶(以C3成分為主)。由于各條區(qū)帶中各個(gè)蛋白質(zhì)組分的重疊、覆蓋(如CER常被α2MG及 Hp所掩蓋),以及某些蛋白質(zhì)染色帶很淺(如脂蛋白和α1糖蛋白),可以用其它染色方法輔助。目前除了常使用的氨基黑和麗春紅染料外,還采用靈敏度更高的考馬亮藍(lán)。
用血清蛋白質(zhì)電泳測定各組分的含量,通??刹捎酶鲄^(qū)帶的濃度百分比(%)或絕對濃度(g/L)表示之。
用醋酸纖維薄膜電泳測得正常小兒及成人血清蛋白質(zhì)的參考值可參見表2-7。
在疾病情況下血清蛋白質(zhì)可以出現(xiàn)多種變化。根據(jù)它們在血清蛋白質(zhì)電泳圖譜上的異常特征,不少學(xué)者曾試將其分為以下類型,參見表2-8及圖2-1。
表2-7 各年齡組血清蛋白質(zhì)電泳正常值(X±SD)范圍
總蛋白質(zhì)(g/L) | 蛋白質(zhì)各組分的濃度比(%) | |||||
白蛋白 | α1 | α2 | β | γ | ||
臍帶血 | 57 | 69.4 | 2.5 | 5.4 | 7.0 | 15.4 |
±12 | ±5.6 | ±1.0 | ±1.6 | ±2.4 | ±4.4 | |
新生兒 | 60 | 64.2 | 3.5 | 14.1 | 9.2 | 6.2 |
±12 | ±13.2 | ±3.6 | ±2.1 | ±2.4 | ±4.8 | |
1-5歲 | 68 | 65.2 | 3.1 | 11.2 | 10.2 | 10.4 |
±11 | ±7.8 | ±1.3 | ±2.7 | ±2.6 | ±5.5 | |
6-12歲 | 69 | 61.7 | 3.0 | 10.5 | 10.2 | 14.7 |
±14 | ±6.1 | ±1.8 | ±3.4 | ±2.0 | ±5.8 | |
成人△1 | 64 | 2.8 | 6.6 | 7.2 | 14.4 | |
45-78 | 0.8-6.2 | 3.4-12 | 4.8-14 | 7.0-25 | ||
2 | 64 | 2.8 | 5.9 | 9.8 | 17.5 | |
55-71 | 0.9-4.8 | 2.6-9.2 | 6.3-13.3 | 12.2-22.3 | ||
3 | 68.7 | 3.1 | 6.0 | 8.2 | 13.8 | |
53-76.6 | 1.3-5.0 | 2.7-9.9 | 5.5-14.9 | 8.8-21.3 | ||
4 | 62.2 | 4.2 | 6.6 | 10.2 | 17.33 | |
47-77 | 0.7-7.6 | 2.4-10.8 | 4-16.4 | 8.8-25.7 | ||
5 | 65.7 | 2.28 | 5.7 | 8.8 | 17.5 | |
58.8-72.7 | 0.7-3.8 | 3.6-7.8 | 6.3-11.3 | 12.3-22.7 |
△資料取自不同作者:①上海醫(yī)科大學(xué)n=50;②重慶醫(yī)科大學(xué)n=123;③同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)n=132;④蘇州醫(yī)學(xué)院n=100;⑤湖南醫(yī)科大學(xué)n=100
表2-8 異常血清蛋白質(zhì)電泳圖譜的分型及其特征
的圖譜類型 | 總蛋白質(zhì) | Alb | α1 | α2 | β | γ | ||
1.低蛋白血癥 | ↓↓ | ↓↓ | N↑ | N | ↓ | N↑ | ||
2.腎病型 | ↓↓ | ↓↓ | ↑ | ↑↑ | 不定 | |||
3.肝硬化型 | ↓N↑ | ↓↓ | N↓ | N↓ | β-γ↑(融合) | |||
4.急性炎癥或急性時(shí)相反應(yīng)癥 | N | ↓N | ↑ | ↑ | N | |||
5.慢性炎癥型 | ↓ | ↑ | ↑ | ↑ | ||||
6.彌漫性肝損害型 | ↓N | ↓↓ | ↑↓ | ↑ | ||||
7.彌漫寬γ球蛋白血癥型 | ↑ | ↓N | ↑↑ | |||||
8.M蛋白血癥型 | 在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白峰-M區(qū)帶峰 | |||||||
9.高α2(β)-球蛋白血癥 | ↓ | ↑↑ | ↑ | |||||
10.妊娠型(高α型) | ↓N | ↓ | ↑ | ↑ | N | |||
11.蛋白質(zhì)缺陷型 | 個(gè)別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏 |
上述電泳圖譜分型有助于臨床疾病判斷的參考。在某些蛋白質(zhì)異常增多的情況下,可出現(xiàn)異常區(qū)帶。如高濃度的αFP可以在Alb與α1區(qū)帶間出現(xiàn)一條清晰的新帶(有人稱之為肝癌型);CRP異常增高可出現(xiàn)特殊界限的γ區(qū)帶;單核細(xì)胞白血病可出現(xiàn)由于溶菌酶異常增多的γ后區(qū)帶等;單克隆免疫球蛋白異常癥(M蛋白血癥)則在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)一條很深的界限截然的M區(qū)帶。
在大劑量使用青霉素或水楊酸等藥物時(shí),由于藥物與白蛋白的結(jié)合,可導(dǎo)致這部分白蛋白電泳遷移率的加快而出現(xiàn)區(qū)帶狀的改變。
急性時(shí)相反應(yīng)型常以α1及α2區(qū)帶加深為特征;妊娠型以α1區(qū)帶增高為特征,伴有β區(qū)帶的增高;以α2區(qū)帶增高為特征的圖譜常見于風(fēng)濕病等免疫反應(yīng)性疾病。其它慢性炎癥則同時(shí)有α1、α2及γ-球蛋白的增加。在肝硬化及慢性肝炎伴肝硬化及慢性肝炎伴肝硬化可以出現(xiàn)β、γ區(qū)帶融合彌散的寬γ帶。慢性遷延型肝炎、慢性活動型肝炎及慢性反復(fù)感染可以出現(xiàn)多條γ區(qū)帶的加深。
2013年衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)資格考試報(bào)考條件
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