2013初級檢驗技師生化檢驗：血清胱抑素C及其臨床應(yīng)用

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　　胱抑素C(CystatinC，簡稱CysC)亦稱半胱氨酸蛋白酶抑制劑C，是一種由120個氨基酸組成，分子量為13kDa的低分子量、堿性非糖化蛋白質(zhì)。CysC基因在包括腎、肝、胰、腸、胃、肺及胎盤等所有組織中持續(xù)地轉(zhuǎn)錄和表達。研究發(fā)現(xiàn)CysC是半胱氨酸蛋白酶抑制物家族的成員之一，是目前發(fā)現(xiàn)的對組織蛋白酶B抑制作用最強的抑制物。同時CysC對木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶、組織蛋白酶H及L也有抑制。

　　目前臨床常用的腎功能檢測以血肌酐、尿素氮等檢測為主。血清尿素氮首先被作為腎功能的評價指標(biāo)，但在臨床應(yīng)用中存在一定的缺陷，因為當(dāng)腎小球濾過率減少到正常值的40%以前，尿素氮濃度升高緩慢，并且其血清濃度與外源性(蛋白質(zhì)攝入量)與內(nèi)源性(感染、腎上腺皮質(zhì)激素的應(yīng)用、胃腸出血等)尿素負荷的大小有關(guān);更重要的是腎小管對尿素氮有明顯的被動重吸收，因此尿素氮不符合GFR內(nèi)源性標(biāo)志物要求。肌酐基本符合內(nèi)源性GFR標(biāo)志物的要求，目前國內(nèi)外仍用血清肌酐作為臨床常規(guī)評估腎小球濾過功能受損的指標(biāo)。但只有當(dāng)GFR下降接近一半時，血清肌酐才有明顯的變化，且其血清含量受性別、飲食、肌肉量等因素的影響。因此，腎功能損害的敏感血清學(xué)指標(biāo)的研究一直是臨床檢驗研究的熱點之一。

　　已有研究證實CysC血清濃度與腎功能損害程度高度相關(guān)，能夠準(zhǔn)確反映人體GFR的變化。臨床老師通過研究血中β2-微球蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白、CysC濃度與GFR的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)CysC血清濃度與GFR的相關(guān)性最好，認為CysC是低分子量蛋白質(zhì)中與GFR最相關(guān)的內(nèi)源性標(biāo)志物，甚至優(yōu)于血清肌酐。因其基因?qū)儆凇翱醇一颉?，CysC蛋白具有產(chǎn)生率及釋放入血速率恒定，能自由通過腎小球濾過，在近曲小管全部重吸收并迅速代謝分解，不和其他蛋白形成復(fù)合物等特點。其血清濃度變化不受炎癥、感染、腫瘤及肝功能等因素的影響，與性別、飲食、體表面積、肌肉量無關(guān)，是一種反映GFR變化的理想的內(nèi)源性標(biāo)志物。

　　CysC因其自身特性越來越多地被用于糖尿病腎病腎臟濾過功能早期損傷的評價、高血壓腎功能損害早期診斷、腎移植病人腎功能的恢復(fù)情況評估、血液透析患者腎功能改變監(jiān)測、老年人腎功能評價、兒科腎病的診斷、腫瘤化療中腎功能的監(jiān)測等。

　　糖尿病腎損害是糖尿病嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥，也是糖尿患者的主要死因之一。腎損害在糖尿病早期就已開始，但此階段病情較隱匿，通常無明顯臨床癥狀，而臨床實驗室常規(guī)腎功能檢測因靈敏度低難以檢出，因此糖尿病早期腎臟損害的發(fā)生和發(fā)展極易被忽視。臨床老師通過比較早期糖尿病患者血清CysC、血肌酐及內(nèi)生肌酐清除率與GFR的相關(guān)性，結(jié)果表明CysC與GFR具有更好的相關(guān)性，同時ROC評價也表明CysC的分析靈敏度和特異性均好于血肌酐及內(nèi)生肌酐清除率，認為使用CysC檢測可為糖尿病腎損害的早期診斷提供準(zhǔn)確可靠的臨床檢驗指標(biāo)。

　　高血壓所致腎損害是高血壓常見并發(fā)癥，早期干預(yù)可改善高血壓患者的預(yù)后。高血壓是通過引起良性小動脈腎硬化而導(dǎo)致高血壓慢性腎損害，臨床研究表明在良性小動脈腎硬化出現(xiàn)臨床癥狀之前，常規(guī)血液及尿液檢查都還正常時，CysC血清濃度即出現(xiàn)異常，表明GFR已經(jīng)改變，慢性腎損害已發(fā)生，因此通過檢測CysC可為及早干預(yù)治療高血壓所致腎損害提供可靠的臨床指標(biāo)。

　　腎移植患者用血清CysC評價移植腎功能，國外已有較多的研究。已有研究表明CysC在腎移植術(shù)后腎功能監(jiān)測中具有很高的臨床應(yīng)用價值，尤其是術(shù)后出現(xiàn)感染時具有早期診斷價值。相比目前臨床廣泛使用的腎功能監(jiān)測指標(biāo)，CysC能更及時、靈敏、準(zhǔn)確地反映腎移植術(shù)后腎功能的變化，對腎移植術(shù)后感染和急性排斥的早期診斷有著明顯的優(yōu)勢。

　　基于CysC的特性和臨床應(yīng)用價值，加之因CysC血清濃度較低，測定方法需較高的分析靈敏度及特異性，檢測CysC的靈敏方法也在不斷發(fā)展。早期有單向免疫擴散法及酶免疫測定法，這兩種測定方法靈敏度低。隨后相繼出現(xiàn)較為靈敏的放射、熒光及各種酶免疫測定方法。這些測定方法都為非均相檢測，操作復(fù)雜且耗時長，不便廣泛臨床應(yīng)用。最近出現(xiàn)了測定CysC的膠乳顆粒增強免疫比濁法，此方法為均相測定，測定時間短，因此該測定方法的研究也成為國內(nèi)外的研究熱點。

　　膠乳顆粒增強免疫比濁法CysC測定是利用血清樣品中的CysC與檢測試劑中適量的特異性標(biāo)記抗體結(jié)合，形成不溶性的免疫復(fù)合物，反應(yīng)液吸光度改變的大小與樣品中的CysC含量呈正相關(guān)的原理進行。該方法可在全自動生化分析儀上進行常規(guī)血清測定。由中生北控生物科技股份有限公司新近自主研發(fā)的顆粒增強免疫比濁法血清CysC液體雙試劑測定試劑盒，采用納米級膠體金標(biāo)記抗體試劑，有效提高了檢測的靈敏度。該試劑盒經(jīng)過在衛(wèi)生部北京醫(yī)院和中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外心血管病醫(yī)院嚴(yán)格的臨床試驗，檢測性能與進口試劑盒相關(guān)性良好，并已開始臨床推廣。

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