2013年初級檢驗技師輔導:全血硒檢查的原理
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(1)甲基百里香酚藍比色法(MTB):血清中的硒離子在堿性溶液中與甲基百里香酚藍(MTB)結合,生成一種藍色的絡合物。加入適量8-羥基喹啉,可消除鎂離子對測定的干擾,與同樣處理的硒標準液進行比較,求得血清總硒含量。
(2)鄰甲酚酞絡合酮直接比色法:鄰甲酚酞絡合酮(OCPC)是金屬絡合染料,也是酸堿指示劑,在pH11.0溶液中與硒螯合,生成紫紅色螯合物。作硒測定時,在試劑中加入8-羥基喹啉以消除標本中鎂離子的干擾。與同樣處理的鈣標準液比色,可求得血清硒含量。
(3)乙二胺四乙酸二鈉滴定法:標本中硒離子在堿性溶液中與硒紅指示劑結合成為可溶性復合物,使溶液成淡紅色。乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA-Na2)對硒離子的親和力很大,能與該復合物中的硒離子絡合,指示劑重新游離而使溶液呈現(xiàn)藍色。所以在滴定鈣時,加入硒紅為淡紅色,用ED-TA-Na2滴定轉(zhuǎn)變?yōu)樗{色時,為滴定終點。與同樣處理的硒標準液滴定,計算出標本中的硒的含量。
(4)離子硒測定:離子選擇電極是一種化學傳感器,它能將溶液中某種特定離子的活度轉(zhuǎn)變成電位信號,然后通過儀器來測量。電極電位隨溶液中離子活度變化的關系服從Nernst方程。
選擇電極的電位(E)與溶液中被測離子活度的對數(shù)成線性關系。
血液抽出后,溶解于其中的CO2氣體會釋放到空氣中,使血液pH值變堿性,而血液pH值則與離子硒濃度之間成負相關的關系,pH值增加0.1,離子硒濃度約降低4%~5%.所以新型的離子型的離子硒分析儀都是在測定血清離子硒濃度的同時,測量血清pH值,再計算出pH7.4時的標準化離子硒(Se)濃度。
離子濃度分析儀通常采用比較法來測定樣品溶液中離子硒和pH值,即先測量二個已知濃度標準液中的離子硒和pH的電極電位,在儀器程序內(nèi)建立一條斜率曲線,然后測量樣品溶液中離子硒和pH的電極電位,從已建立的斜率曲線上求出樣品溶液中離子硒濃度和pH值,并計算出標準化離子硒濃度,直接在儀器上顯示出結果或打印出分析報告。
(5)同原子吸收分光光度法原理。
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