臨床醫(yī)學檢驗復習資料:志賀菌屬微生物檢驗
臨床醫(yī)學檢驗復習資料:志賀菌屬微生物檢驗
1、標本采集
盡可能在發(fā)病早期及在治療前采集新鮮糞便,選擇粘液膿血便,必要時可用肛拭子采集。
2、檢驗方法及鑒定
(1)分離培養(yǎng):取糞便(粘液或膿血部分)或肛拭標本接種GN肉湯增菌及再進行分離培養(yǎng)。一般同時接種強弱選擇性不同的兩個平板。強選擇性鑒別培養(yǎng)基可用沙門、志賀菌選擇培養(yǎng)基(SS);弱選擇培養(yǎng)基可用麥康凱或中國藍培養(yǎng)基。培養(yǎng)18-24小時后選取可疑菌落進行下列鑒定。
(2)鑒定:
1)初步鑒定:挑選可疑菌落3-4個先用志賀菌屬多價診斷血清作試探性玻片凝集試驗。將試探性凝集試驗陽性的菌落至少接種2-3支KIA(克氏雙糖)和MIU(動力、吲哚、脲酶),經(jīng)35℃18-24小時,凡符合KIA:K/A、產(chǎn)氣-/+、H2S,MIU:動力-、吲哚、脲酶-,氧化酶-,并結(jié)合試探性玻片凝集試驗陽性結(jié)果可鑒定為志賀菌屬。
2)最后鑒定:增加甘露醇(+/-)、蔗糖(-/+)(宋內(nèi)志賀菌屬遲緩陽性)、檸檬酸鹽(-)、苯丙氨酸脫氨酶(-)、ONPG(β-半乳糖苷酶)及鳥氨酸脫羧酶(-)(宋內(nèi)志賀菌屬為陽性);用志賀菌屬的診斷血清作群型鑒定。A群痢疾志賀菌,甘露醇陰性,10個血清型。B群福氏志賀菌,有6個血清型和X、Y2個變種。C群鮑氏志賀菌,15個血清群。D群宋內(nèi)志賀菌,僅有一個血清型,有光滑型和粗糙型兩種菌落。
3、與大腸埃希菌的鑒別
(1)無動力,不發(fā)酵乳糖,靛基質(zhì)陰性,賴氨酸陰性。
(2)發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀菌6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外)。
(3)分解黏液酸,在醋酸鹽和枸櫞酸鹽瓊脂上產(chǎn)堿。
4、與類志賀鄰單胞菌和傷寒沙門菌的鑒別
可用動力和氧化酶試驗加以鑒別,志賀菌為陰性,而類志賀鄰單胞菌為陽性。
傷寒沙門菌硫化氫和動力陽性,能與沙門菌屬因子血清凝集而不與志賀菌屬因子血清凝集。
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