臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師醫(yī)學(xué)微生物學(xué)第一講:(2)
臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師醫(yī)學(xué)微生物學(xué)第一講:(2)
(八)細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則
同學(xué)們應(yīng)重點(diǎn)掌握:1.細(xì)菌學(xué)診斷(1)標(biāo)本的采集原則(2)檢驗(yàn)程序
2.血清學(xué)診斷:常用的血清學(xué)診斷方法
3.人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫(1)適應(yīng)性(特異性免疫)的獲得方式(2)人工免疫的概念和常用的免疫制劑
1.細(xì)菌學(xué)診斷
(1)標(biāo)本的采集原則:嚴(yán)格無(wú)菌操作,在抗生素使用之前采集,采樣后盡快冷藏送檢及做好標(biāo)記。
(2)病原菌的檢測(cè)程序:依次是標(biāo)本的采集,直接鏡檢,病原微生物分離培養(yǎng),抗原檢測(cè)、分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)微生物特異性DNA或RNA、免疫學(xué)試驗(yàn)。
2.血清學(xué)診斷
(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、放射免疫試驗(yàn)(RIA)及免疫熒光試驗(yàn)(IF)
ELISA、RIA及IF均為用于檢測(cè)感染者血清中特異性抗體或抗原的方法,均為應(yīng)用標(biāo)記的抗原檢測(cè)血清中抗異性抗體,或應(yīng)用標(biāo)記的抗體檢測(cè)血清中特異性抗原。
(2)蛋白印跡試驗(yàn)(Western blot,WB)
蛋白印跡試驗(yàn)(WB)是在ELISA應(yīng)用原理基礎(chǔ)上發(fā)展的一項(xiàng)新技術(shù),用于檢測(cè)微生物的特異性蛋白抗原或患者相對(duì)應(yīng)的蛋白抗體的實(shí)驗(yàn)室診斷方法。若用此試驗(yàn)檢測(cè)患者血清特異性抗體,可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特異性抗體,再結(jié)合酶標(biāo)記抗人抗體并觀察結(jié)果。
(3)中和試驗(yàn)(NT)
中和試驗(yàn)(NT)為在檢測(cè)病原微生物(病毒、細(xì)菌等)的血清學(xué)試驗(yàn)過(guò)程中,先在被檢血清或其他液體標(biāo)本中加人已知的特異性抗體或抗原,使其發(fā)生中和反應(yīng)后,再檢測(cè)被檢血清中其特異性抗原或抗體。
(4)試管凝集試驗(yàn)
肥達(dá)氏試驗(yàn)是輔助診斷傷寒或副傷寒病常用的一種血清學(xué)試驗(yàn),即用已知傷寒沙門(mén)氏菌的菌體抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)及甲型或乙型副傷寒桿菌的鞭毛抗原(PA或PB抗原),測(cè)定人血清中相應(yīng)抗體效價(jià)。
3.人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫
(1)適應(yīng)性免疫(特異性免疫)的獲得方式:對(duì)某種感染性疾病的特異性免疫可由病后天然免疫和人工免疫獲得。人工免疫又分為人工主動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫。
(2)人工免疫的概念
①人工主動(dòng)免疫:是用人工接種的方法給機(jī)體注射抗原性物質(zhì)(疫苗),使機(jī)體免疫系統(tǒng)因受抗原刺激而產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答的過(guò)程。此種免疫應(yīng)答出現(xiàn)較晚,維持時(shí)間較長(zhǎng),多用于疾病的預(yù)防。
?、谌斯け粍?dòng)免疫:為將含有特異性抗體的免疫血清或免疫細(xì)胞因子等制劑,直接注入機(jī)體,使之立即獲得免疫力。此種免疫持續(xù)時(shí)間短。
(3)常用的免疫制劑
1)人工主動(dòng)免疫制劑:
?、贉p毒活菌(疫)苗:如卡介苗、布氏桿菌減毒活菌苗等。
②滅活菌(疫)苗:如傷寒、百日咳及霍亂死疫苗等。
③類毒素:為細(xì)菌外毒素經(jīng)0.3%~0.4%甲醛液處理后,其毒性消失,但仍保留抗原性的生物制品。
?、軄唵挝灰呙纾喝缒X膜炎球菌和肺炎球菌的莢膜多糖疫苗。
⑤基因重組疫苗或稱基因工程疫苗:將微生物特異性抗原表達(dá)基因,與工程菌(如酵母菌)充足并表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)物,經(jīng)純化制成疫苗。最成功的為乙型肝炎重組疫苗。
?、?DNA疫苗:是將編碼病原表面某種具有保護(hù)性免疫作用的抗原基因插入酵母菌,使之表達(dá)目的基因。處于研究階段。
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